中国油料作物学报

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遗传育种

甘蓝型油菜BnADC基因的克隆及原核表达

洪林，闫晓红，袁亚宾，刘王辉，胡长清，李晨，陈春丽，魏文辉

2012, 34(1): 8-15.

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利用同源克隆和RACE(Rapid amplification of cDNA ends)技术从甘蓝型油菜中克隆到精氨酸脱羧酶(Arginine decarboxylase，ADC)基因cDNA全长序列，命名为BnADC。BnADC全长为2 649bp，包含344bp的5′非翻译区(5′ Untranslated region，5′-UTR)、226bp的3′非翻译区(3′ Untranslated region，3′-UTR)和2 079bp的完整开放阅读框(open reading frame，ORF)，编码75.1kD的蛋白质。5′-UTR中含有12bp的uORF (Upstream open reading frame)，编码MIRE 4个氨基酸。氨基酸同源性比对表明，BnADC蛋白与其他植物ADC蛋白具有很高的相似性，与芥菜的同源性高达93%；系统进化树分析表明，BnADC与芥菜、拟南芥的ADC亲缘关系较近。在获得全长cDNA的基础上，构建融合表达载体pET30a(+)-BnADC，转化大肠杆菌（Escherichia coli）表达菌株BL21(DE3)，SDS-PAGE检测到一个约81.1kD的融合蛋白被E. coil表达，且融合蛋白主要存在于菌体沉淀中。

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遗传育种

甘蓝型油菜与Brassica maurorum的异源六倍体后代及BC2细胞学分析

姚行成，葛贤宏，李再云

2012, 34(1): 16-20.

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将甘蓝型油菜品种中油821（2n=38, AACC）与芸薹属野生资源Brassica maurorum（2n=16, MM）的三倍体杂种进行染色体加倍，得到异源六倍体（2n=54, AACCMM）。该多倍体雄性高度不育，雌性育性极低。在其花粉母细胞的减数分裂终变期，染色体平均配对构型为1.17Ⅰ+20.71Ⅱ+0.56Ⅲ+2.25Ⅳ+0.08Ⅴ+0.06Ⅵ。用甘蓝型油菜与该多倍体连续回交2次，均需借助幼胚培养才得到后代植株，BC1、BC2植株均雄性不育，雌性育性很低。BC2植株的形态特征接近甘蓝型油菜，但各植株形态有明显差异。基因组原位杂交分析表明，BC2植株含有2~5条M基因组的染色体，甘蓝型油菜染色体多配对形成二价体，附加的染色体多以单价体形式存在，或与甘蓝型油菜染色体发生联会配对。

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遗传育种

甘蓝型油菜隐性核不育上位基因抑制作用专一性研究

吴新杰，胡宝成，陈凤祥，李强生，侯树敏，费维新，江莹芬，荣松柏，黄晓荣

2012, 34(1): 21-24.

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将甘蓝型油菜隐性上位互作核不育系9012A的临时保持系12-148-204-F14TAM、204TAM分别与双隐性核不育系5A杂交，研究隐性上位抑制基因rfrf对5A中不育基因ms1ms1ms2ms2的抑制作用。结果表明rfrf基因对ms1ms1ms2ms2的不育性表达没有抑制作用，而对9012A中不育基因ms3ms3ms4ms4的具有专一抑制作用。

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遗传育种

中国白菜型油菜种质表型多样性分析

陈碧云，许鲲，高桂珍，闫贵欣，李俊，伍晓明

2012, 34(1): 25-32.

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以保存于油料作物中期库中的1 962份白菜型油菜种质为基础材料，按照地理位置、表型性状分组并按比例取样，选择具有代表性的244份地方品种，对其13个表型性状进行分析。结果显示，来源于山西省的冬油菜生育日数较长，来源于青海、内蒙古、甘肃等省的春油菜生育期较短；来源于四川省的半冬型油菜株高较高；来源于云南、四川省的半冬型油菜全株角果数较多；来源于西藏的材料千粒重较大。多样性指数结果表明，我国白菜型油菜地方种具有丰富的形态多样性，平均多样性指数为1.709, 高于国外材料(1.250)；就不同生态类型而言，半冬型油菜多样性指数最高，其次为春油菜，冬油菜最低。聚类分析结果显示，在相似系数为0.204时，244份白菜型油菜地方种质划分为四簇，每簇包含的种质数分别为117、38、34和55；簇Ⅰ以半冬型油菜为主，簇Ⅱ、Ⅲ以春油菜为主，簇Ⅳ以冬油菜为主。主成分分析结果显示，白菜型油菜分为春油菜、半冬型油菜与冬油菜三个明显的基因库，其结论与聚类分析结果一致。

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栽培生理

不同基因型油菜对苗期水分胁迫的生理响应

李震，吴北京，陆光远，程勇，邹崇顺，张学昆

2012, 34(1): 33-39.

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通过盆栽试验分析了17个不同基因型甘蓝型油菜对苗期水分胁迫的生理响应及抗旱性差异。结果表明，水分胁迫下不同油菜材料9个生理生化指标的抗旱系数（Dc）存在显著差异，其中叶片萎蔫指数（WI）的变异系数和改良潜力最大。17份材料的平均隶属函数值（AS）变幅在0.12～0.94之间。相关分析表明AS与9个生理生化指标达显著或极显著相关，其中相关性最高的是WI和叶绿素含量，而且WI还与其余的8个生理生化指标具有很高的相关性。利用隶属函数法和系统聚类法对供试材料的抗旱性进行了评价分级，发现两种分类方法的评价结果一致，均可将供试油菜材料划分为不抗、低抗、中抗和高抗4种类型。鉴定获得了华杂10号、B108、Q2和中双7号等4份高度抗旱材料（AS > 0.75）。由于WI与苗期综合抗旱性高度相关，且测定简便，因此叶片萎蔫指数可作为油菜苗期抗旱性鉴定的关键指标。

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栽培生理

干旱及复水对油菜苗期光合及叶绿素荧光特性的影响

蒙祖庆，宋丰萍，刘振兴，张方凯

2012, 34(1): 40-47.

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以西藏当地推广的油菜代表品种芥菜型油菜(Brassica juncea L.)年河1号、白菜型油菜（Brasscia rapa L.）青油17号和甘蓝型油菜（Brasscia napus L.)藏油5号为材料，设置持续干旱1周和2周的2个干旱处理及干旱后复水1周、2周、3周的3个时期，研究苗期干旱及复水对油菜光合及荧光特性的影响。结果表明：（1）干旱胁迫造成油菜实际光化学效率（ФPSⅡ）、表观光合电子传递速率（ETR）、光化学淬灭系数（qP）、净光合速率（Pn）、气孔导度（Gs）、胞间CO2浓度（Ci）、蒸腾速率（Tr）均下降，且随干旱时间延长而降低。PSⅡ反应中心完全关闭时荧光产量(Fm）、最小荧光（Fo）随干旱时间延长而升高。PSⅡ原初光能转化效率（Fv/Fm）、PSⅡ的潜在活性（Fv/Fo）相对变化小，下降不显著。（2）干旱后复水1～2周时，油菜气体交换参数较前期干旱处理均有升高，复水2周后升高幅度大于1周，尤其是干旱2周处理后复水时参数值大幅度升高；复水3周时，油菜气体交换参数呈下降趋势，净光合速率明显下降。（3）干旱后复水1～2周时，油菜PSⅡ、ETR、qP值较对照均有升高，复水1周后较2周后的升高幅度大，尤其是干旱2周处理后复水时，它们的升高幅度大于干旱1周处理后复水的情形；Fm、Fo较对照仍有升高，复水3周各荧光参数值下降。复水后Fv/Fm、Fv/Fo值变化相对较小。

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栽培生理

水钾耦合对大豆光合特性及其产物积累运转的影响

闫春娟，韩晓增王文斌宋书宏

2012, 34(1): 48-55.

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盆栽条件下，研究了不同生育时期水钾耦合对大豆光合特性及水分利用效率的影响，并对光合速率与各器官干物重进行相关分析。结果表明：苗期与花期控水时，土壤水分及水钾互作极显著影响光合速率（Pn）；结荚期控水时，水分极显著影响Pn。花期与荚期控水后测定的Pn要高于苗期的Pn。水钾耦合对光合速率（Pn）、蒸腾速率（Tr）和气孔导度（Gs）的影响趋势相似，即水分效应要优于钾肥，且一般而言同一钾肥水平下，土壤水分的影响表现为：W4>W3、W5>W2>W1。只有当土壤水分供应适宜（W3）时，钾肥的施用提高了植株的Pn、Tr和Gs。水分对植株水分利用效率（WUE）的影响要优于钾肥，且水分为正效应。苗期及开花期控水条件下，植株的Pn与根、茎、叶干物重呈极显著正相关（p<0.01），且Pn与各器官的相关程度表现为茎>叶>根；结荚期植株Pn与根、茎、叶干物重仍呈极显著正相关（p<0.01），与荚粒干物重呈显著正相关（p<0.05）。

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栽培生理

旱涝急转对不同花生品种生理生化指标的影响

周西，李林，单世华，刘登望，周浩，刘宇，

2012, 34(1): 56-61.

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为探讨旱涝急转对花生生理生化的影响，以不同旱涝耐性的3个花生品种中花8号（抗旱）、豫花15（耐涝）和湘花2008（旱涝兼耐）为材料，进行不同梯度的先旱、后涝连续处理，比较不同花生品种的叶片相对含水量，过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽还原酶（GR）活性，以及丙二醛（MDA）含量的变化情况。结果表明，在旱、涝急转的胁迫过程中，干旱对叶片相对含水量的影响甚于湿涝。一定强度的旱或涝胁迫总体上均可使花生叶片的4种抗氧化酶POD、SOD、CAT、GR活性提高，随着胁迫的加深活性降低，复水后活性回落至对照水平，且旱甚于涝。MDA含量总体变化趋势是干旱胁迫下各品种花生叶片中MDA含量有所升高，并于复水解除干旱胁迫后恢复至对照水平；而湿涝处理阶段，MDA含量呈直线上升趋势，在胁迫解除后有所降低。中花8号、豫花15、湘花2008等3个花生品种具有显著不同的水分适应性，中花8号抗旱性更强而耐涝性较弱，豫花15抗旱性较弱而耐涝性强，湘花2008抗旱性中等而耐涝性更强，为水分广适性品种。

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土肥植保

酸性黄棕壤中钼磷配施对甘蓝型油菜苗期碳氮代谢的影响

刘红恩，，胡承孝，聂兆君，孙学成，谭启玲

2012, 34(1): 62-68.

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利用酸性黄棕壤进行盆栽试验，研究了钼磷配施对甘蓝型油菜苗期碳氮代谢的影响。结果表明，施钼和施磷均显著增加叶片叶绿素含量、光合速率、可溶性总糖含量以及地上部干物质重和可溶性蛋白质含量，显著降低油菜苗期叶片硝态氮含量；且钼肥和磷肥配施对促进油菜苗期碳氮代谢存在协同效应。钼肥和磷肥提高油菜光合速率的机制有所不同，钼肥主要提高叶肉细胞光合活性，而磷肥则增加气孔导度。

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土肥植保

中国东北地区大豆主要食叶害虫空间动态分析

刘健，赵奎军

2012, 34(1): 69-73.

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对大豆蚜等7种食叶性害虫的田间分布型及其在豆株上的分布规律进行了系统研究。发生前期，大豆蚜Aphis glycines Masumura主要集中于植株上部叶片；发生中期，有向植株中、下部转移的趋势；后期，又迁至植株上部叶片危害。大豆蚜田间呈聚集分布型。茄无网长管蚜Acythosiphon solani (Kaltenbach)、二条叶甲Monolepta nigrobilineata (Motsch.)成虫及豆卜馍夜蛾Bomolocha tristalis Lederer幼虫为全株发生。其中，二条叶甲成虫田间呈随机分布型。茄无网长管蚜发生前期至中后期，田间多呈聚集分布；发生后期，呈Poisson分布型。豆卜馍夜蛾幼虫发生前期，田间呈聚集分布；发生中后期，多呈均匀分布。豆黄蓟马Thrips nigropilosus Uzel若虫主要集中于植株上部发生，成虫全株发生。发生前期，豆黄蓟马为聚集分布；发生中期，成虫为均匀分布、若虫为聚集分布；发生后期，成虫为聚集分布、若虫为Poisson分布。双斑萤叶甲Monolepta hieroglyphica (Motsch.)成虫主要集中于植株上部发生。发生前期、后期，田间呈均匀分布型；发生中期，呈聚集分布型。发生前期及中期，大造桥虫Ascotis selenaria Schiffermüller et Denis幼虫主要于植株上部叶片发生，田间呈均匀分布型；发生后期，则转移至全株危害，呈Poisson分布型。

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测试与加工

转基因油菜筛查检测策略研究

张丽，武玉花，吴刚，曹应龙，李均，卢长明

2012, 34(1): 74-81.

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根据收集到的国内外已商业化转基因油菜品种的基因元件信息，构建了油菜转基因检测分子特征矩阵，在分析基因元件使用频率的基础上，建立了转基因油菜的筛查检测策略。研究发现，利用P-CaMV35S、P-FMV35S和bar这三个元件组合，对现有转基因油菜品种的筛查检出率可达100%。将P-CaMV35S、P-FMV35S、bar、CP4-¬EPSPS、PAT和T-NOS组合，每个转化事件可检出至少两次，增加了检测的可靠性。同时，分析了不同转化事件中同名基因元件的序列差异，进一步验证了分子特征矩阵筛查方法的可行性。

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测试与加工

橘林油脂酵母发酵条件的初步研究

张东辉，梁焯，万霞，龚阳敏，江木兰，

2012, 34(1): 82-86.

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以橘林油脂酵母（Lipomyces kononenkoae CICC1714）为实验材料，通过设计单因素实验，确定了摇瓶发酵培养的最佳产油条件为：氮源为硫酸铵，碳源为葡萄糖，培养温度28℃，接种量10%，初始pH值为7.0，最适碳氮比为99。优化后批次发酵的生物量为7.01g/L，油脂含量15.91%，油脂产量1.12g/L。经半连续发酵后最终的生物量为24.13g/L，油脂产量为3.06g/L。

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测试与加工

精炼工艺对菜籽油流变特性的影响

刘昌盛，杨湄，黄凤洪，郑畅，周琦

2012, 34(1): 87-91.

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以菜籽毛油为原料，分析了脱胶、脱酸、脱色和脱臭（四脱精炼）对菜籽油流变特性以及品质的影响。研究结果表明，四脱精炼对菜籽油的脂肪酸组成和折光指数无显著影响；在恒温下，随着剪切速率的增加，菜籽油的粘度先逐渐减小再趋于稳定，即菜籽油是由非牛顿流体逐渐向牛顿流体转化；同时在大范围的剪切速率下，剪切应力与剪切速率呈近线性关系，菜籽油为牛顿流体；精炼所导致的菜籽油粘度差别与微量成分相关，并且精炼可以降低菜籽油的屈服应力值；Herschel-Bulkley的简化方程xy=o+K(dVx/dY)或者Bingham方程相对适宜用于表征菜籽油在四脱精炼过程中的流变特性。

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研究简报

吉林35胚尖再生体系的建立及对农杆菌的敏感性

闫帆，孙昕，翟莹，雷婷，张庆林，苏连泰，王英，李景文，王庆钰

2012, 34(1): 92-95.

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为建立一个简便、高效、稳定的大豆胚尖再生体系，以吉林35为材料，胚尖为外植体，研究氯气、升汞、酒精3种消毒方法对不定芽出芽率的影响和6-BA对不定芽再生率的影响。同时，为检测吉林35的农杆菌易感性，对平安8、东农42、吉林47和吉林35四个大豆品种进行gus基因组织化学染色。研究表明，酒精消毒法对种子伤害较小，可以保证较高的出芽率。6-BA对不定芽再生作用显著，单独使用或配合IBA使用均可获得较高的再生率。gus基因组织化学染色结果表明吉林35的农杆菌易感性强，明显优于其它品种。吉林35胚尖外植体再生率较高且对农杆菌易感性较强，是遗传转化良好的受体材料。

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研究简报

花生连作对土壤酶活性的影响

黄玉茜，韩立思，韩梅，肖亦农，杨劲峰，韩晓日

2012, 34(1): 96-100.

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为评价辽宁地区花生连作对土壤生物性状的影响，对不同连作年限花生土壤酶活性动态变化进行了研究。结果表明，随着花生连作年限的增加，在整个生育期内，土壤酸性和中性磷酸酶活性均呈现先升高后下降的趋势，活性排列顺序为连作2年＞连作4年＞正茬＞连作6年；土壤脲酶活性在整个生育期内总体上呈现先下降后升高再下降的趋势；土壤过氧化氢酶和转化酶活性在不同生育时期内其变化规律不一致。连作改变了土壤酶活性，使花生根系毒害作用和土壤磷素流失加重，使土壤状况，pH值，氮素供应能力均发生变化。

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研究简报

油棕EST序列中SSR的分布特征分析

吴春太，陈青，刘锐，李维国，

2012, 34(1): 101-105.

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为充分利用现有公共数据库中的EST资源开发EST-SSR引物，本研究从GenBank数据库获取39 227条油棕EST，通过聚类拼接和处理，得到全长为7977.734 kb的无冗余序列15 716条。在这些序列中共检索出699个SSRs，检出率为4.45%，平均11.41 kb出现1个SSR，包括99种重复基元。其中，二核苷酸和三核苷酸重复是主要的类型，分别占总SSRs的38.48%和25.32%。在所有的核苷酸重复基序中，二核苷酸重复序列AG/CT所占比例最高，约占27.47%。Blastx分析发现44.95%的SSR-ESTs与非冗余蛋白质序列数据库(nr)中功能基因同源，功能已知的蛋白质中葡萄来源的SSR-ESTs所占比例最大，为4.42%。同时对54条SSR-ESTs通过GO体系进行功能分类，其中46条能找到同源物，其余8条无同源物，这些序列可划分为18个亚类，在所有功能亚类中，结合活性的功能项和SSR-ESTs数量最多，另外580条未被注释功能信息。本结果将为利用EST-SSR标记来研究油棕基因组学和开展分子育种工作提供参考依据。

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研究简报

新型向日葵细胞质雄性不育系和恢复系的筛选

梁国战，张贵祥，魏廷武

2012, 34(1): 106-108.

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采用复合油葵杂交种LD06 F1选株自交，在其F2中，有粉株和不育株成对杂交后，用菊芋（H.petiolaris）的全DNA加渗透液的混合液按时涂抹已授粉的葵盘柱头。经多代分离选育，育成了不育系CMSUA5-1和相应的保持系UB5-2。CMSUA5-1与现有不育系CMSPET-1的恢复系杂交多代试验中，不能被CMSPET-1的恢复系所恢复，证明现有的恢复系与新选出的恢复系不同，新选出的恢复系UR5-3只能恢复CMSUA5-1，说明UR5-3是一个新型栽培向日葵的恢复系。

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综述与专论

草酸脱羧酶的性质及应用

舒佳宾，官春云

2012, 34(1): 109-113.

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草酸脱羧酶（Oxalate decarboxylase，OXDC）是一种包含Mn2+的多聚酶，属于cupin超家族，能够在没有辅因子的条件下催化草酸分解为甲酸和CO2。该酶已在农业、工业和医学诊断中得到广泛的应用。本文综述近几年来OXDC在结构、功能和实际应用方面的研究，重点讨论了其在油菜抗菌核病方面的作用和优势，为油菜抗菌核病的研究提供参考。

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综述与专论

我国油菜生产应对气候变化的对策和措施分析

张树杰，王汉中

2012, 34(1): 114-122.

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摘要：本文分析了近年来气候变化特点及对我国油菜生态环境及油菜生产的影响。结果表明，随着气温升高，冬油菜潜在种植面积显著增加，传统的油菜生产格局发生改变，体现出明显的“东减、北移、西扩”特征；由于降水分布不均、极端气候事件频繁，油菜单产增加趋势减缓，油菜生产的不稳定性显著增加。根据当前油菜生产所面临的问题，提出了整合育种和栽培措施的应对策略。

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遗传育种

多环境下大豆单株荚数性状的QTL分析

高静瑶，刘春燕，蒋洪蔚，胡国华，陈庆山，

2012, 34(1): 1-7.

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利用Charleston×东农594重组自交系构建的SSR遗传图谱，采用WinQTLCart2.5软件的CIM和MIM分析方法对2006年-2010年连续5年的大豆荚数的数据进行QTL定位，在11个连锁群上共定位了43个QTLs。检测到15个控制一粒荚数的QTLs，分别位于A1、A2、C2、D1a、D1b和N连锁群；检测了10个控制二粒荚数的QTLs，分别位于A1、B1、D1a、I、J和N连锁群上；检测了10个控制三粒荚数的QTLs，分别位于A1、B1、C2、D1a、D1b和I连锁群；检测到8个四粒荚数的QTLs，分别位于A1、D1a、E和H连锁群。在2007年和2009年检测到3个QTLs位点，Qspntws-J-2、Qspntws-N-1、Qspnfs-D1a-2均为多年稳定遗传的QTL位点；分别在A1、D1a、D1b连锁群上各检测到一个QTL位点，同时控制多个性状。