土壤磷素高效利用转基因大豆特异性PCR检测方法

姚 涓,潘志文,陈伟庭,周 峰,穆 虹,姜大刚,梅曼彤

中国油料作物学报 ›› 2012, Vol. 34 ›› Issue (2) : 152-156.

PDF(1044 KB)
欢迎访问《中国油料作物学报》, 2025年6月23日 星期一
PDF(1044 KB)
中国油料作物学报 ›› 2012, Vol. 34 ›› Issue (2) : 152-156.
遗传育种

土壤磷素高效利用转基因大豆特异性PCR检测方法

  • 姚 涓,潘志文,陈伟庭,周 峰,穆 虹,姜大刚*,梅曼彤*
作者信息 +
文章历史 +

摘要

华南农业大学根系生物学研究中心采用拟南芥的紫色酸性磷酸酶基因AtPAP15转化大豆品系粤春03-3(YC03-3),获得了酸性磷酸酶活性明显提高、可高效利用土壤磷素的转基因大豆新品系AP15-1。以AP15-1为研究对象,应用TAIL-PCR技术,根据载体序列设计特异引物,获得了转化载体左侧插入的旁邻序列。设计事件特异性检测引物,进行PCR扩增,只能在AP15-1的样品中扩增出特异性条带,进一步用实时荧光定量PCR作分析,结果显示,该引物对重复性好,融解曲线显示只有一个特异峰值。本实验应用该引物对建立的检测方法,检测的灵敏度可以达到0.01%,实时荧光定量PCR检测的极限值可以达到9个基因组的拷贝数,能够满足对转基因大豆新品系AP15-1及其衍生品种检测的需要。

关键词

转基因大豆 / TAIL-PCR / 事件特异性检测 / 定量PCR

引用本文

导出引用
姚 涓,潘志文,陈伟庭,周 峰,穆 虹,姜大刚,梅曼彤 . 土壤磷素高效利用转基因大豆特异性PCR检测方法
[J]. 中国油料作物学报, 2012, 34(2): 152-156
中图分类号: Q788    S565.1   

参考文献

[1] Liao H, Wan H Y, Shaff J, et al. Phosphorus and aluminum interactions in soybean in relation to al tolerance: exudation of specific organic acids from different regions of the intact root system [J]. Plant Physiology, 2006, 141: 674-684.
[2] Wang X R, Wang Y X. Tian J, et al. Overexpressing AtPAP15 enhances phosphorus efficiency in soybean [J]. Plant Physiology,2009, 151(1): 233-240.
[3] James C. Global status of commercialized biotech/GM crops: 2010, ISAAA Brief No. 40 Executive Summary [M]. New Yor. International Service for the Acquisition of Agribiotech Applications (ISAAA), 2010.
[4] Liu Y G, Chen Y L, Zhang Q Y. Amplication of genomic sequence flanking T-DNA by thermal asymmetric interlaced polymerase chain reaction [A]. Pena L. Transgenic plants: methods and protocols [C]. Totowa:Humana Press, 2005, 341-348.
[5] 转基因植物及其产品检测 - DNA 提取和纯化(农业部1485号公告-4-2010) [S]. 北京.中华人民共和国农业部,2010.
[6] Arumuganathan K,Earle E D. Nuclear DNA content of some important plant species [J]. Plant Mol Biol Rep, 1991, 9(3), 208–218.
[7] 聂淑晶,武玉花,吴 刚,等.转基因油菜RF1的外源基因插入位点分析与事件特异性检测方法研究 [J]. 中国油料作物学报,2008,30(3):265-271.
[8] Su C Q, Xie J J, Wang X F, et al. Integrated structure and event-specific real-time detection of transgenic cry1Ac/SCK rice Kefeng 6 [J]. Eur Food Res Technol, 2011, 232:351–359.
[9] Wu G, Wu Y H, Nie S J, et al. Real-time PCR method for detection of the transgenic rice event TT51-1 [J]. Food Chemistry, 2010, 119:417-422.
PDF(1044 KB)

3307

Accesses

0

Citation

Detail

段落导航
相关文章

/