中国油料作物学报

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遗传育种

大豆膨胀素GmEXPA4基因的克隆及表达分析

闻静，李凤兰，赵刚，孙丽，孙莉莉，胡宝忠

2012, 34(4): 343-347.

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根据其他植物膨胀素基因保守区设计简并引物，以大豆矮化突变体HK808幼芽的cDNA为模板，克隆到530bp的膨胀素基因保守区片段，并结合RACE 技术克隆得到expansin基因全长序列，将其命名为GmEXPA4基因。生物信息学分析结果表明，该基因属于膨胀素中的α-expansin亚家族。GmEXPA4基因的实时荧光定量相对表达分析表明，该基因在东农42及其矮化突变体HK808中的各个时期都有表达，且与植物的生长量密切相关。

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遗传育种

根癌农杆菌农杆菌介导抗菌肽基因转化大豆的研究

李春风，张兴政，张洁莉，韩阳，宋书宏

2012, 34(4): 348-352.

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为利用抗菌肽基因培育转基因大豆抗病材料，采用根癌农杆菌介导法将抗菌肽基因和绿色荧光蛋白基融合因转入大豆胚尖外植体。结果表明，60mg/L的卡那霉素可以对转化植株进行有效的筛选；在共培养时添加200µmol/L乙酰丁香酮有利于抗菌肽基因的转化；在生根培养基中不添加卡那霉素更有利于转化苗的成活。目的基因特异的PCR检测和绿色荧光蛋白表达分析，发现抗菌肽基因已转入大豆，并得到表达。

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遗传育种

一种适用于油菜、大豆、花生、芝麻四种油料作物种子的RNA提取方法

孙海波，，，王智慧，，刘学群，覃瑞，黄军艳，董彩华，刘胜毅

2012, 34(4): 353-358.

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本研究在商业化RNA提取试剂盒的基础上，通过以下3方面的改进使之成功应用于油菜、花生、芝麻和大豆的各个时期的种子RNA提取。1）增加抗氧化剂巯基乙醇和PVP；2）根据不同作物的油脂含量调整氯仿的比例；3）改进RNA沉淀方法。与常规的CTAB、TRIZOL及文献报道的RNA提取方法比较结果显示，本方法提取的RNA在完整性、得率及质量上都优于上述方法，并成功应用于后期荧光定量表达分析。FAD2基因在四种作物种子不同发育时期的差异表达结果进一步证明了此方法的有效性。

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遗传育种

高油酸甘蓝型油菜油酸积累动态

高建芹，浦惠明，龙卫华，胡茂龙，戚存扣

2012, 34(4): 359-365.

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为了解高油酸甘蓝型油菜突变种质的特点，分析了两组材料营养器官和生殖器官中油酸积累的动态变化特点。结果表明：营养器官油酸相对含量从高到低排序为根、茎、叶。不同生育期营养器官油酸含量变化表现为：根中，成熟期高，其次是苗期，然后是越冬期、蕾薹期、返青期，花期最低；茎中，成熟期最高，其次是返青期，花期较少，苗期、越冬期和蕾薹期最少；叶中，蕾薹期最高，花期次之，苗期、越冬期和返青期最少。油菜开花2周内，角果中油酸积累以果皮为主，第3周起则转为以种子为主。果皮中油酸相对含量在开花后3周达到最大值。油菜营养器官中的油酸与成熟种子中的油酸相对含量均呈显著正相关（r=0.81*）。除花期外，各生育期营养器官与生殖器官中的油酸相对含量呈极显著正相关(r=0.92**)。表型结果说明供试品系的油酸调控基因是组成型表达的，育种上可通过检测营养器官油酸含量来预测和筛选种子高油酸含量的材料。

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遗传育种

不同贮藏方式对油菜种质资源生活力和农艺性状的影响

高桂珍，陈碧云，许鲲，闫贵欣，李俊，伍晓明

2012, 34(4): 366-371.

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为了解保存在长期库、冰柜和干燥器中的种质，其田间出苗率、主要农艺性状和含油量如何变化，调查了三种贮藏方式下的53份油菜。结果表明储藏11～14年之间的种质田间出苗率平均值都高于储藏19～25年之间的种质，长期库和冰柜中保存的种子出苗率高于干燥器中保存的，表明干燥器不利于种子的长期保存。在长期库、冰柜和干燥器三种保存方式下，11个农艺性状的平均值一致表现为长期库优于冰柜，更优于干燥器；其中全株角果数、单株产量、单株重和分枝高度在三种保存方式下变异较大，变异系数在20％以上；角果宽度和含油量变异较小，变异系数在9％以下，说明不同保存方式不但影响种子活力和田间出苗率，还影响农艺性状。相关分析表明，因保存方式不同，出苗率表现不一致，与之相关的农艺性状也不同；在不同的储藏年限间，出苗率与株高、一次分枝数、全株角果数、主序角果数、单株产量均呈显著正相关。干燥器中保存的种质，因为活力丧失严重，整体出苗率较低，很难判断出苗率与农艺性状间的相关性。

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遗传育种

基于ISSR标记的云南紫苏资源的遗传多样性研究

王仕玉，郭凤根

2012, 34(4): 372-376.

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利用14条引物对滇产16份紫苏资源的遗传多样性进行ISSR分析，共扩增出128条条带，其中81条为多态带，平均多态率为62.54%，表明云南紫苏资源的遗传多样性程度较高。采用SPSS16.0软件分析，16份滇产紫苏资源间的Rogers-Tanimoto相似性系数界于0.463~0.882之间。UPGMA法聚类将16份紫苏资源分为5类，分别对应紫苏种下的5个变种，研究结果为云南紫苏种下变种的分类提供了分子水平的依据。

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栽培生理

不同花生基因型对干旱胁迫的适应性

张智猛，戴良香，宋文武，丁红，，陈静，万书波

2012, 34(4): 377-383.

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以北方花生产区推广种植的29个花生品种（系）为试材，在人工控水条件下，对中度土壤水分胁迫下的植株形态、生物质累积和光合色素含量等指标变化进行研究。结果表明，干旱胁迫下，不同品种主茎高、分枝数总体上降低，根冠比、光合色素含量和比叶面积增大，且随胁迫时间延长变化趋势明显，叶绿素a增加最为明显。不同花生品种对土壤水分胁迫程度和胁迫时间的反应不同，且品种间差异明显。此外，干旱胁迫造成的同一品种或品种间生物量积累分配、根/冠和比叶面积等性状的差异，在不同生长阶段并不完全一致。苗期各指标与品种（系）抗旱性间无显著相关关系；花针期各指标与抗旱性间相关关系显著，是花生干旱胁迫的敏感期。综合分析表明，花育17号、花育25号、唐科8号、丰花1号、鲁花14、冀花4号和花育27号具有较强的耐旱抗旱能力。

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栽培生理

花生种子LOX3活力测定及其对储藏特性的影响

高奇，，吴洪义，张瑛，，张正竹，刘泽，黄训端，吴跃进，张琛，滕斌，周俊峰，吴敬德，蒋岚，宣云，

2012, 34(4): 384-389.

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为测定花生中脂肪氧化酶(Lipoxygenases，LOXs；EC 1.13.11.12)活性，本研究在已有作物脂肪氧化酶LOX3 β-胡萝卜素耦合比色法基础上进行优化，建立了花生LOX3活力定量测定方法，确定最适取样量8mg，最适测定时间为反应开始后10~70s。利用该方法研究214份花生种质资源的LOX3活性分布，表明材料间酶活差异极显著(P<0.01)。对其中LOX3活力高低差异明显的24份材料进行扩繁，并在自然条件下进行18个月仓储试验，结果表明，花生LOX3活力与其种子活力呈极显著正相关(相关系数为0.6984，P<0.01)，高LOX3活力花生种子储藏寿命也较长。该结果为进一步探讨脂肪氧化酶与花生种子储藏特性的相关性提供了依据。

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栽培生理

杂交油菜云油杂10号高产栽培因子的优化

原小燕，符明联，李根泽，何晓莹

2012, 34(4): 390-395.

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为了探讨在云南省油菜生产中种植密度（X1）、氮肥（纯氮，X2）、磷肥（五氧化二磷，X3）、钾肥（氧化钾，X4）、硼肥（有效硼，X5）5个栽培因子对甘蓝型双低油菜云油杂10号产量的影响，并进一步优化各栽培因子，本文采用五元二次正交旋转组合设计，建立了油菜产量优化数学模型：Y=246.15 +12.70X2 +7.00 X3-6.26X12-9.81 X22-5.07X32-10.56X1X2-6.37X3X4。结果表明各因素对云油杂10号产量的影响大小顺序依次为氮肥、磷肥、种植密度、硼肥、钾肥。其中种植密度、氮肥、磷肥与产量的关系均呈开口向下的抛物线，种植密度过大或过小，施氮、磷肥过多或过少都会对油菜产量造成影响。种植密度与氮肥、磷肥与钾肥交互作用对油菜产量有显著影响，在种植密度10.5～22.5万株/hm2、施纯氮0～207kg/hm2、施五氧化二磷0～96kg/hm2、施氧化钾0～120kg/hm2时，两因子之间均为正相互作用。频率分析结果表明，油菜产量大于3 900kg/hm2的优化栽培措施为种植密度15.48～17.94万株/hm2、纯N、五氧化二磷、氧化钾、有效硼施用量分别为360.2～387.1、170.0～181.4、15.0～30.0、1.46～1.84kg/hm2。

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栽培生理

60Co-γ射线辐照对苏子生长及生理特性的影响

谭美莲，汪磊，严明芳，王力军，严兴初

2012, 34(4): 396-401.

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为创新苏子（Perilla frutescens L. Britt）种质资源及为苏子辐射诱变育种提供技术参考，研究了不同剂量60Co -γ射线（0、200、400、600和800Gy）照射条件下，兴仁花苏和山甲苏子2种苏子种子的萌发率、田间出苗率和幼苗高度、活力指数以及MDA含量、过氧化物酶（POD）和超氧化物歧化酶（SOD）活性。研究结果表明，辐射对苏子种子发芽率影响不明显，但对田间出苗率、幼苗高度、活力指数及相关生理指标都存在极显著影响。在800Gy范围内，随着辐射剂量的增强，田间出苗率先缓慢下降后急剧下降，幼苗植株变矮，活力指标降低；而幼苗MDA含量、SOD活性及POD 活力均随剂量的增加而不断上升。兴仁花苏比山甲苏子对辐照更为敏感，其田间出苗率急剧下降时的剂量比后者低，其幼苗的生长和生理指标（MDA含量、SOD活性及POD活性）受辐照影响均比山甲苏子明显，其理论半致死剂量和理论临界剂量也比后者低。 10Gy/min剂量率下，兴仁花苏的半致死剂量和临界剂量分别为512.37Gy和570.80Gy，山甲苏子的则分别为679.74Gy和716.79Gy。

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土肥植保

不同钾效率类型油菜的农艺性状及钾素积累特征比较

刘晓伟，鲁剑巍，李小坤，徐维民，潘琴

2012, 34(4): 402-406.

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为了解甘蓝型油菜不同钾素利用效率的植株所具有的表型特征，以长江流域冬油菜主产区广泛种植的34个甘蓝型油菜品种为试验材料，在田间试验小区以最佳肥料用量（每公顷210kg 氮，45kg五氧化二磷，67.5kg氧化钾）种植油菜，比较不同品种油菜对钾素的吸收利用率。根据平均值法可将材料分为四类：A-高效吸收高效利用型、B-低效吸收高效利用型、C-高效吸收低效利用型、D-低效吸收低效利用型。比较发现：A类的一次分枝数、一次分枝角果数、籽粒产量和茎秆干物质均显著高于B、C、D三类，每角粒数显著大于D类，而分枝节位则显著小于D类。A类籽粒钾含量和钾（氧化钾）积累显著高于其他类型。地上部钾积累总量表现为A（和C）高于B（和D）。

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土肥植保

滴灌大豆氮素积累与分配的肥效差异

姜妍，刘燕，刘伟，王浩，于佳，王绍东，李远明

2012, 34(4): 407-412.

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利用节水滴灌技术，通过设置不同的肥料用量和施肥时期处理，研究其对滴灌大豆氮素积累、分配、利用及产量的影响，以形成节水灌溉与施肥相结合的栽培技术。其中种肥为尿素75kg/hm2、磷酸二铵150kg/hm2、硫酸钾90kg/hm2；滴肥为尿素127.5 kg/hm2、磷酸二氢钾为133.5 kg/hm2。结果表明，在滴灌条件下前期种肥的供给对大豆氮素积累及产量的形成非常重要，T1（1/2种肥）、T2（种肥）、T4（1/2种肥+花期1/2滴肥）、T5（1/2种肥+结荚期1/2滴肥）处理的滴灌大豆氮素积累量大，转移率和吸收利用率较高。综合产量因素，在施用种肥，结荚期再施用滴肥(即T5处理下)，施肥方式效果最佳。

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土肥植保

甘肃省白菜型冬油菜霜霉病发生规律

李荣峰，徐秉良，梁巧兰，尹婷

2012, 34(4): 413-418.

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引起甘肃省白菜型冬油菜霜霉病的病原菌为十字花科寄生叉霜霉菌Peronospora parasitica (Pers.) Fr.该病菌可为害叶片、茎秆和角果，病部出现白色霜状霉层。据调查，2009年-2011年间，油菜收获期霜霉病发病最严重，平均发病率和病情指数达32.80%和28.40。冬油菜霜霉病田间孢子囊4月上旬始见，5月22日左右达到高峰，平均为71个/100cm2；温度、相对湿度分别为16℃、95%时，接种72h后冬油菜霜霉病即可发生；当5d内平均温度为10.3℃、平均相对湿度为61.0%和5d内降雨量累计值为1.6mm时，田间孢子囊数目达最大，为76个/100cm2。陇油9号发病率和病情指数比其它品种显著高。小麦-冬油菜轮作可减轻霜霉病的发生。

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土肥植保

油菜黑胫病菌（Leptosphaeria biglobosa）生物学特性研究

郝丽芬，，宋培玲，，李子钦，包玉英，李强生，胡宝成

2012, 34(4): 419-424.

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为了解我国油菜黑胫病病原菌（Leptosphaeria biglobosa）的生物学特性，在实验室里研究了温度、pH值、光照、碳源及氮源等条件对该病菌营养生长及分生孢子产生的影响。结果表明：病原菌在5℃～35℃均可进行营养生长并产孢，最适生长和产孢温度为25℃；在pH4～10的范围内该菌均能生长并产孢，在pH7的条件下生长最快，产孢最多。光暗交替有利于菌丝生长和产孢，而持续光照不利于菌丝生长，尤其不利于产孢。最适的碳源、氮源分别是可溶性淀粉、牛肉膏。分生孢子的致死温度为52℃。

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土肥植保

黑龙江省土壤中大豆疫霉菌（Phytophthora sojae）的多样性

李爽，文景芝

2012, 34(4): 425-432.

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为探究不同类型土壤中大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)的多样性，以分离自5种不同类型土壤的176株P. sojae为研究对象，利用基因推导法和AFLP分子标记技术进行多样性分析。结果表明，不同类型土壤中P. sojae无毒基因型、无毒基因种类、无毒基因组合和群体致病力均表现出差异性，其中黑土、白浆土和草甸土中的P. sojae无毒基因型、无毒基因种类和无毒基因组合多样性相对丰富，群体致病力中等偏弱；盐碱土中的P. sojae无毒基因型、无毒基因种类和无毒基因组合多样性丰富度较低，群体致病力相对较强；风沙土中没有分离到P. sojae。聚类分析表明，以0.76为阈值时，可将176株P. sojae划分为6个组，其中黑土和白浆土中的P. sojae呈现丰富的遗传多样性；草甸土和盐碱土中的P. sojae遗传多样性丰富度较低。综合分析表明，黑龙江省P. sojae群体无毒基因和遗传多样性丰富，并与土壤类型存在一定的相关性。

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土肥植保

采用五种杀菌剂测定花生褐斑病菌的室内毒力和田间药效

温少华，晏立英，方先兰，雷永，陈荣华，廖伯寿

2012, 34(4): 433-437.

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为了筛选对花生褐斑病田间防治效果好的杀菌剂，结合室内毒力测定（菌丝生长速率法和载玻片萌发法）和田间小区药效试验对四种杀菌剂与常规使用的杀菌剂多菌灵进行了比较。结果表明，室内毒力测定中，多菌灵对菌丝的抑制效果最强，抑菌率为91.4%；其余四种供试杀菌剂中以咪酰胺效果最好，抑菌率达85.6%；王铜效果最差；多菌灵对分生孢子的抑制率为60.9%，其余四种杀菌剂效果差异不显著。田间药效试验结果显示，咪酰胺2 000mg/kg对花生褐斑病的田间防治效果达60.62%，远远高于对照药剂多菌灵（15.53%）以及其它三种供试杀菌剂。此外咪酰胺挽回32.28%的产量损失，也远远高于其它几种药剂。通过室内毒力试验和田间药效试验表明，田间杀菌剂防治花生褐斑病时，咪酰胺比对照药剂多菌灵具有更好的防治效果，适用于花生褐斑病重病地区。

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测试与加工

量子点标记荧光免疫法检测花生中黄曲霉毒素B1

李园园，，李培武，，张奇，，张文，，丁小霞，，张兆威，

2012, 34(4): 438-442.

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建立了基于量子点标记二抗的间接竞争荧光免疫吸附测定方法（indirect competitive fluorescence-linked immunosorbent assay，cFLISA），并研究检测花生中黄曲霉毒素B1可行性。采用谷胱甘肽为稳定剂，在水相中直接合成碲化镉（CdTe）量子点，并利用EDC与兔抗鼠二抗进行共价偶联，以黄曲霉毒素B1的单克隆抗体建立cFLISA方法。结果表明，该方法的灵敏度和最低检测限值分别为0.023ng/mL和0.001ng/mL，与传统的有机染料FITC-二抗法比较，灵敏度提高了30倍，花生样品加标0.1、0.05和0.025ng/g，回收率范围在88%~116%之间，变异系数均小于10%。建立的cFLISA方法可以较好的检测花生中黄曲霉毒素B1，并为其它真菌毒素的检测提供参考。

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综述与专论

控制作物种子大小的基因研究进展

朱伟, 陈小平, 梁炫强

2012, 34(4): 443-448.

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种子大小是影响农作物产量的主要因素之一，提高种子产量对改善人类生活水平具有重要作用。研究控制种子大小的重要基因，并寻找高产相关的功能基因，对作物高产育种具有重要的理论意义和应用价值。目前，通过基因失活或超量表达分析，已经发现了一些控制种子大小的功能基因。这些功能基因参与胚、胚乳、珠被的发育过程，通过调控细胞的增殖和伸长程度控制种子的大小。本文主要综述现已鉴定的控制种子大小的一些重要基因。

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综述与专论

液相芯片及其在粮油主要真菌毒素同步检测中的应用

李鑫，李培武，，张奇，张文，张兆威

2012, 34(4): 449-454.

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液相芯片整合了分子生物学、免疫学、高分子材料、微流控技术、高速数字信号处理、计算机分析等多方面技术，可实现少量样本高通量定性定量检测。本文主要阐述液相芯片定性与定量分析的基本原理、特点及其在分析领域的应用现状，探讨液相芯片在小分子高通量分析中的工作模式及其当前技术难点，分析黄曲霉毒素等粮油主要真菌毒素免疫分析研究进展，指出液相芯片在粮油主要真菌毒素检测中将有广泛的应用前景。

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综述与专论

近红外光谱技术在农产品品质检测中的应用

谭正林, 吴谋成, 傅廷栋

2012, 34(4): 455-460.

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近红外光谱技术是一种新型的无损检测技术，在许多领域都得到了很好的应用。本文从农产品中各种物质成分含量预测、分类鉴别、腐烂鉴别、实时监测几个方面综述了近红外光谱技术在农产品品质检测上的应用，并对其在仪器硬件的研究和开发、化学计量学方法的探索与研究以及快速在线检测方法的研究等方面的发展趋势进行了展望。