中国油料作物学报

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遗传育种

甘蓝型油菜AnnBn1基因的克隆和表达分析

肖庆生，张学昆，许本波，程勇，郑普英，陆光远&，#68，

2012, 34(2): 123-128.

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利用电子克隆和RT-PCR技术从甘蓝型油菜抗旱品系Q2中克隆了膜联蛋白(annexin)基因，命名为AnnBn1（GenBank登录号HM244482），并对其进行了表达分析。AnnBn1的开放阅读框长度为954bp，编码317个氨基酸。序列分析显示，推测AnnBn1基因编码的氨基酸序列含有4个重复的结构域及钙离子结合位点，与拟南芥、番茄、棉花和玉米等物种的膜联蛋白具有较高的同源性。荧光定量PCR结果发现AnnBn1基因在Q2的根、茎、叶、芽等组织中均有表达，而且表达量基本相同。对3叶期幼苗进行10%PEG（聚乙二醇）溶液模拟干旱时发现，干旱胁迫后30h内，AnnBn1基因在茎、芽中的表达量升高了2～4倍，而在叶、根中显著升高了10倍以上。AnnBn1基因表达峰值也具有时空特点，干旱胁迫后20h茎和芽中表达量高，而在30h之后叶和根中表达量高。

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遗传育种

大豆籽粒不同发育时期基因表达谱分析

陈欢，杨美英，王真慧，孙旸，王刚，魏玮，关瑜，王法微，李海燕，陈光

2012, 34(2): 129-135.

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以花后15DAF(开花后天数)的大豆籽粒作为对照，通过Solexa高通量测序方法对花后35DAF、55DAF和65DAF的大豆籽粒进行转录水平上的检测，并结合GO功能注释和pathway分析，共有差异表达unigene为9 905个，其中调控脂肪酸合成途径的显著差异表达基因12个，蛋氨酸代谢途径关键基因6个。以55DAF的cDNA为样本，荧光定量PCR检测了12个差异表达基因，其结果可与测序结果互为印证。

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遗传育种

利用青海大黄油菜和芥兰合成大粒甘蓝型油菜

富贵，赵志刚，杜德志

2012, 34(2): 136-141.

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利用青海大黄油菜（QD, 2n=20, AA）与几种不同的甘蓝(CC, 2n=18)正反杂交，辅以幼胚抢救、子房培养和染色体加倍技术人工合成甘蓝型油菜。结果表明：以QD为母本的多个杂交组合获得69株杂种苗，反交组合均未得到正常发育的胚。与中迟芥兰杂交后的QD子房在MS、1/2MS、MS+0.2 mg/L 6-BA三种培养基中得胚率依次为15.5%、8.9%和4.4%，共获得24个杂种胚，而在MS+1.5mg/L 6-BA+0.25mg/L NAA分化培养基上角果内未发现成熟胚。染色体加倍处理结果表明，在培养基中添加秋水仙素后加倍率最高（59.4%～86.4%）。SSR分子标记结果显示：受试材料全部为真杂种，并且没有出现新增带和缺失带。人工甘蓝型油菜在形态上介于双亲之间，千粒重较高，达到5.48g～7.45g，显著高于甘蓝型油菜品种青油14号和中双4号。

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遗传育种

甘蓝型油菜2009-2010年候选品种遗传多样性及群体结构

许鲲，谷铁城，刘凤兰，李浩，陈碧云，高桂珍，伍晓明

2012, 34(2): 142-151.

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利用45对SSR(简单序列重复)和5对EST (表达序列标签)-STS（序列标签位点)标记对2009-2010年度165份新育成甘蓝型冬油菜进行遗传多样性及群体结构分析。50个标记检测到131个多态性片段，每个标记等位变异数由1至7不等，平均为2.62，多态性比率为95.83％，PIC均值0.519。165份品种在遗传相似系数0.519 0～0.938 0范围内聚类，平均为0.721 4。全部品种多样性指数Shannon（H）0.314 4，Simpson（I）0.470 3。杂交种整体多样性水平要高于常规种，细胞质不育杂交种略高于细胞核不育杂交种。4个生态区域中华东地区所育品种的两种指数最高，分别为0.314 0（H）和0.466 3（I），西北地区最低，为0.271 1（H）和0.405 9（I）。主成分（PCA）以及群体结构分析均显示细胞核不育杂交种与细胞质不育杂交种两种类型间以及中南与西北区域细胞质不育杂交种间存在遗传差异。165份材料群体结构分为8个组。组Ⅰ中质不育杂交种占50%，核不育杂交种和常规种各占近25%。组Ⅱ、Ⅳ、Ⅵ、Ⅶ基本为细胞质不育杂交种，Ⅲ、Ⅴ、Ⅷ三个组以细胞核不育杂交种为主。在细胞质不育杂交种为主的组中，西北区域与中南区域育成品种存在较明显的遗传差异。细胞核不育类型品种为主的3个组显示出更为复杂的遗传背景。

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遗传育种

土壤磷素高效利用转基因大豆特异性PCR检测方法

姚涓，潘志文，陈伟庭，周峰，穆虹，姜大刚，梅曼彤

2012, 34(2): 152-156.

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华南农业大学根系生物学研究中心采用拟南芥的紫色酸性磷酸酶基因AtPAP15转化大豆品系粤春03－3（YC03-3），获得了酸性磷酸酶活性明显提高、可高效利用土壤磷素的转基因大豆新品系AP15-1。以AP15-1为研究对象，应用TAIL－PCR技术，根据载体序列设计特异引物，获得了转化载体左侧插入的旁邻序列。设计事件特异性检测引物，进行PCR扩增，只能在AP15-1的样品中扩增出特异性条带，进一步用实时荧光定量PCR作分析，结果显示，该引物对重复性好，融解曲线显示只有一个特异峰值。本实验应用该引物对建立的检测方法，检测的灵敏度可以达到0.01%，实时荧光定量PCR检测的极限值可以达到9个基因组的拷贝数，能够满足对转基因大豆新品系AP15-1及其衍生品种检测的需要。

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栽培生理

渍水胁迫对苗期油菜根系形态与生理活性的影响

王琼，张春雷&，#68，，李光明，李俊，李玲，程博

2012, 34(2): 157-162.

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盆栽条件下研究连续渍水胁迫对2个油菜品种中双9号和中油杂12号苗期根系形态及生理活性的影响。结果表明，渍水处理初期(前5d)两个油菜品种根系超氧自由基阴离子（O2.-）产生速率均较对照显著提高，超氧化物歧化酶(SOD)活性较对照显著升高，活性氧累积引起的细胞膜脂过氧化程度（MDA含量）变化不显著，根系生物量及形态参数未发生显著变化。但随着渍水时间延长至5d后，根系O2.-产生速率继续加快而SOD和过氧化氢酶（CAT）活性显著降低，细胞膜脂过氧化程度（MDA含量）显著提高；根系组织坏死严重，根生物量显著降低；根系形态发生显著变化，根表面积、根体积、主根长和总根长显著降低，平均根直径显著增加，须根数量明显减少。

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栽培生理

不同磷钾处理下套作大豆干物质积累及钾肥利用率的动态变化

向达兵，郭凯，杨文钰

2012, 34(2): 163-167.

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在磷钾供应条件下，以贡选1号为材料，研究了套作大豆干物质积累及钾肥利用率的动态变化。结果表明，套作大豆干物质积累量和钾素吸收量随生育时期推进而持续增加，两者变化趋势一致，符合“S”形曲线，均可用Logistic方程y=k/(1+ae-bx)加以拟合。干物质积累速率前期缓慢，随后迅速上升，出苗后79.3d达到高峰后缓慢下降，钾肥吸收速率与干物质积累速率趋势一致，但最大吸收速率出现时间（出苗后73.6d）早于干物质积累最大速率出现时间。钾肥利用率呈现先升高后降低的趋势，最高阶段利用率与最大吸收速率出现时间基本一致（出苗后75d～90d）。施用磷钾提高了钾素吸收速率、干物质积累速率、钾肥积累利用率和阶段利用率，但没有改变其变化趋势。

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栽培生理

不同花生品种(系)萌发期耐盐性的鉴定与评价

刘永惠，沈一，陈志德，王州飞，颜伟

2012, 34(2): 168-173.

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为筛选耐盐品种以及开展花生耐盐相关研究，本文以相对发芽势、相对发芽率和相对发芽指数为指标对41个花生品种（系）萌发期的耐盐性进行鉴定。结果表明，盐胁迫对花生种子萌发有显著的抑制作用，这种抑制效应随着胁迫浓度的增加而增强，0.5%NaCl浓度胁迫能较好反映品种萌发期的耐盐性差异，可用于花生品种资源的耐盐性鉴定。聚类分析表明，在欧氏距离D=15水平上可以细分为A、B、C、D、E共5个类群，其中A类群耐盐性较强，E类群表现为盐敏感。不同地区品种对不同NaCl浓度的耐性差异明显，河南品种的耐盐性较强；不同类型花生品种中以高世代品系的耐盐性较强。本研究筛选到3份耐盐品种和2份盐敏感品种，可用于花生耐盐的相关研究。

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土肥植保

氮磷钾肥施用对甘蓝型春油菜产量及肥料利用效率的影响

李月梅

2012, 34(2): 174-180.

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利用大田试验研究了氮、磷、钾肥对青海省互助县种植的甘蓝型春油菜产量、养分吸收量和肥料利用效率等指标的影响。结果表明，氮肥和磷肥对春油菜(甘蓝型杂交油菜青杂2号)籽粒产量的提高有显著作用，钾肥的影响相对较小；与不施肥对照相比，氮、磷、钾肥的施用可显著促进成熟期春油菜地上部N、P、K素累积量(P<0.05)；不同肥料的春油菜农学利用率分别为5.3kg/kg N、5.6kg/kg P2O5和1.7kg/kg K2O；肥料表观利用率分别为N 33.6%、P2O5 7.8%和K2O 52.0%, N、P、K肥对油菜籽产量的偏生产力分别为28.0kg/kg N、46.7kg/kg P2O5和26kg/kg K2O。青海省互助县种植条件下，当春油菜产量水平在3 504kg/hm2时，NPK配施条件下每生产100kg籽粒需要吸收N、P2O5、K2O量分别为4.6kg、2.0kg和5.6kg，氮磷钾比为1:0.43:1.21。油菜生产实践中实现高产目标需同时关注地力培肥和平衡施肥两方面。

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土肥植保

富含硫氨基酸转基因大豆对根际土壤微生物群落结构的影响

桂　恒，张培培，华小梅，彭　欣，孔令如，陈　丰，戚金亮，喻德跃，杨永华

2012, 34(2): 181-187.

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选用两组转基因品质改良大豆（富含硫氨基酸）为材料，利用磷脂脂肪酸（PLFA）法分析了在大田种植条件下，两组转基因大豆对土壤微生物群落结构的影响。结果表明，与非转基因大豆相比，转基因品种土壤微生物群落的结构发生明显的变化。在两组转基因品种中PLFA组分均发生变化，其中转基因品种A组中占主导地位的14种分别是是革兰氏阳性菌（GP）的特征脂肪酸16:0、10Me18:0和好氧细菌特征脂肪酸18:1ω7c，Ｂ组中占主导地位的13种是表征GP的脂肪酸15:0、16:0和非特征脂肪酸14Me16:0。在A组的OE-8品种及B组的17-4和57品种中，表征细菌的PLFA含量和总PLFA含量与非转基因品种相比有显著上升。结果表明种植转基因大豆影响根际土壤微生物群落结构。

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土肥植保

一个大豆锈病新抗源的筛选与鉴定

单志慧，刘艳，巴红平，单连民，陈海峰，沙爱华，邱德珍，杨中路，陈水莲，周新安

2012, 34(2): 188-192.

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采用离体叶片接种方法对2007-2010年收集的1 000份大豆种质资源进行抗性筛选，得到1份高抗材料SX6907。SX6907在接种后20d不产生侵染病斑；在高浓度锈菌接种时，产生少数红褐色RB（Red-brown）病斑，但无孢子堆破裂现象，无孢子产生；SX6907的接种表现与已知抗病品种主要表现为黄褐色TAN型感病病斑明显不同。组织学观察表明， SX6907在接种部位造成细胞坏死，侵染点无孢子形成，其抗性表现为抗锈菌侵染。SX6907是一个优异的抗锈病资源，可做亲本在抗锈病育种中应用。

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土肥植保

尖孢镰刀菌胡麻专化型(Fusarium oxysporum f . sp. lini) ISSR标记聚类分析

苑琳，刘姗姗，路福平，李子钦，张辉，陈佩文

2012, 34(2): 193-200.

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结合形态学特征和分子生物学方法对我国尖孢镰刀菌胡麻专化型菌株进行鉴定、聚类分析和遗传变异分析。结合传统分类方法和ITS序列分析，确定6省区96株菌株为尖孢镰刀菌。采用ISSR（简单重复序列区间）分子标记技术对这96株菌株进行分析，12条引物共扩增出800个条带，多态性条带数为797条，多态性为99.62%；在相似性系数为0.88处，96株供试菌株被分为5个类群。聚类结果表明，胡麻枯萎病菌种内存在明显的多态性，且ISSR类群与地理来源存在相关性。

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研究简报

NaCl胁迫对向日葵幼苗生长及茎组织解剖结构的影响

刘海学，张卫国，刘海臣，孙长霞，刘鹏，朱文碧

2012, 34(2): 201-205.

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通过盆栽实验对3个向日葵品种康地5号、2603、KWS203进行中性盐（NaCl）胁迫处理，研究NaCl胁迫对向日葵幼苗生长的影响，并观察其茎组织解剖结构。结果表明，中性盐对康地5号伤害较轻，而对2603和KWS203伤害比较严重，2603和KWS203之间的受伤害程度差异不显著。随着胁迫强度的增加，3个向日葵品种出苗时间均有所延迟，出苗率下降；幼苗相对苗高和叶片数也受到明显影响，当NaCl浓度为0.2mol/L时对向日葵幼苗生长影响最严重。茎的解剖结构观察表明，随着盐胁迫强度的增加，康地5号薄壁细胞和皮层细胞层数明显增多，另外2个向日葵品种也有增加；它们的皮层厚角组织层数也均有增加；茎细胞中粗针晶明显增多，提高了耐盐性。

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研究简报

芝麻种子带菌检测及药剂消毒处理效果

赵辉，倪云霞，鲁晓阳，刘红彦，王鹏涛

2012, 34(2): 206-209.

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采用吸水纸检测法对我国6个芝麻主产区的13个广泛栽培的芝麻品种进行了带菌检测，并测定了5种杀菌剂对芝麻种子的消毒效果。结果表明，芝麻种子外部携带真菌的主要类群包括镰孢属（Fusarium spp.）、棒孢属（Corynespora spp.）、长蠕孢属（Helminthosporium spp.）、壳球孢属（Macrophomina spp.）、链格孢属（Alternaria spp.）、曲霉属（Aspergillus spp.）和青霉属（Penicillium spp.），其中引起芝麻茎点枯病的壳球孢属分离频率和带菌率最高。种子内部携带的真菌类群主要包括镰孢属、棒孢属、壳球孢属和曲霉属等，引起芝麻叶枯病的棒孢属真菌分离频率和带菌率最高。供试的5种杀菌剂对芝麻种子均有一定的消毒效果，其中50 %扑海因和80%多菌灵处理对芝麻种子消毒效果最显著。

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研究简报

索氏抽提测定含油量的方法改良及其应用

方敏，丁小霞，李培武，张兆威，陈小媚，姜俊，张文，甘冬生

2012, 34(2): 210-214.

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对索氏抽提法测定含油量的方法进行了改良，在原索氏抽提装置上加装了恒温冷凝水系统，将冷凝水温度改为恒温15℃。改良后的索氏抽提法与原方法相比，测定结果的准确度和灵敏度显著提高，有效消除了因季节、气候等因素引起的温度变化所带来的测定值差异。2007年至2010年加拿大谷物委员会组织36家国际权威油料检测实验室开展国际油料品质比对检测，结果显示，本实验室检测结果|Z|值均小于2，且采用改良索氏抽提法后，测定结果的Z比分数由-1.98~-0.12减小到-0.60~0.20，相对偏差由-2.5%~-0.38%减小到-1.24%~0.24%，实现了含油量检测结果的国际接轨。

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综述与专论

十字花科作物根肿病的侵染生理与抗性遗传研究进展

王芳展，刘亚培，张梅，胡帅，刘振宁，余小林

2012, 34(2): 215-224.

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十字花科植物根肿病是由芸薹根肿菌侵染而引起的危害最大的病害之一，近年来，该病在世界范围尤其是在欧洲、北美、东亚等地区日趋严重，我国很多地区的十字花科作物也正面临着根肿病的严重威胁。本文就芸薹根肿菌侵染过程中寄主植物的生理生化变化及其分子基础、根肿病抗性遗传规律和分子标记与遗传图谱等多方面的研究进展做一概述，并对该领域今后的研究进行了展望。

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综述与专论

国内外紫苏研究进展概述

谭美莲, 严明芳, 汪磊, 王力军, 严兴初

2012, 34(2): 225-231.

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本文概述了紫苏在开发利用、种质资源收集评价、栽培与生理、活性物质提取、组织培养、转基因及基因克隆表达分析等生物技术研究方面的国内外研究进展情况，以期为紫苏的深入研究和进一步开发应用提供参考，有效促进紫苏产业的发展。